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一文與您分享液相色譜儀的分離過程

點擊次數(shù):949 更新時間:2022-12-08

  液相色譜儀既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長,為推動該領域的進步和發(fā)展作出了巨大貢獻。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個恒定值而是指壓力波動范圍在50PSI(3.3Bar)之間(在使用梯度洗脫時,柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的),壓力過高、過低都屬于柱壓問題。
 
  液相色譜儀的分離過程:
 
  同其他色譜過程一樣,HPLC也是溶質(zhì)在固定相和流動相之間進行的一種連續(xù)多次交換過程。它借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離。
 
  開始樣品加在柱頭上,假設樣品中含有3個組分,A、B和C,隨流動相一起進入色譜柱,開始在固定相和流動相之間進行分配。分配系數(shù)小的組分A不易被固定相阻留,較早地流出其色譜柱。分配系數(shù)大的組分C在固定相上滯留時間長,較晚流出其色譜柱。組分B的分配系數(shù)介于A,C之間,另一個流出其色譜柱。若一個含有多個組分的混合物進入系統(tǒng),則混合物中各組分按其在兩相間分配系數(shù)的不同先后流出其色譜柱,達到分離之目的。
 
  不同組分在色譜過程中的分離情況,首先取決于各組分在兩相間的分配系數(shù)、吸附能力、親和力等是否有差異,這是熱力學平衡問題,也是分離的條件。
 
  其次,當不同組分在色譜柱中運動時,譜帶隨柱長展寬,分離情況與兩相之間的擴散系數(shù)、固定相粒度的大小、柱的填充情況以及流動相的流速等有關。所以分離較終效果則是熱力學與動力學兩方面的綜合效益。

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